酸奶中乳酸菌的測(cè)定實(shí)驗(yàn)

一、樣品稀釋

先將酸奶樣品攪拌均勻，用無菌移液管吸取樣品25 ml加入盛有225 ml無菌水的三角瓶中，在旋渦均勻器上充分振搖，務(wù)必使樣品均勻分散，即為10：1的樣品稀釋液，然后根據(jù)對(duì)樣品含菌量的估計(jì)，將樣品稀釋至適當(dāng)?shù)南♂尪取?/p>

二、制平板

選用2~3個(gè)適合的稀釋度，培養(yǎng)皿貼上相應(yīng)的標(biāo)簽，分別吸取不同稀釋度的稀釋液1 ml置于平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度作2個(gè)重復(fù)。然后用溶化冷卻至46 ℃左右的MRS或改良CHALMERS培養(yǎng)基倒平皿，迅速轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使之混合均勻，冷卻成平板。

三、培養(yǎng)和計(jì)數(shù)

將平皿倒置于40 ℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24~48 h，觀察長(zhǎng)出的細(xì)小菌落，計(jì)菌落數(shù)目，按常規(guī)方法選擇30~300個(gè)菌落平皿進(jìn)行計(jì)算。

1.  指示劑顯色

由于產(chǎn)酸菌落周圍能使CaCO3產(chǎn)生溶解圈，酸堿指示劑應(yīng)呈酸性顯色反應(yīng)。

2.  鏡檢形態(tài)

必要時(shí)，可挑取不同形態(tài)菌落制片鏡檢確定是乳桿菌或乳鏈球菌。保加利亞乳桿菌呈桿狀，成單桿、或雙桿菌或長(zhǎng)絲狀。嗜熱鏈球菌，呈球狀，成對(duì)、或短鏈、或長(zhǎng)鏈狀。

3.  參照比較

據(jù)介紹，改良CHALMERS培養(yǎng)基的檢出率較MRS培養(yǎng)基高，M17培養(yǎng)基較適合于乳球菌的培養(yǎng)，在檢測(cè)時(shí)可同時(shí)使用多個(gè)培養(yǎng)基作比較。